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新品先容|小鼠甲基化芯片
宣布日期:2023-02-27浏览:

前言

 

DNA甲基化在调理基因表达中起着动态作用。它使细胞获得并坚持一种特殊状态,抑制病毒和非宿主DNA元素的表达,并增进对情形刺激的反应。异常的DNA甲基化(高甲基化或低甲基化)及其对基因表达的影响与许多生物学历程有关,包括癌症、神经疾病、朽迈和发育。

 

甲基化研究的主要手段有全基因组甲基化测序(WGBS)、简化基因组甲基化测序(RRBS)、甲基化DNA免疫共沉淀测序(MeDIP-seq)以及甲基化芯片。其中甲基化芯片MethylationEPIC BeadChip以其稳固性、可重复性以及性价比,在甲基化研究领域被普遍应用。现在主流人类DNA甲基化芯片是针对人类的450K 和 850K 两种,然而研究职员也需要针对模拟人类疾病状态的模子生物举行研究。

 

为了知足这一需求,9001cc金沙生物引入了Illumina提供的Infinium小鼠甲基化芯片。通过FOXO BioScience,Inc.与Van Andel Institute的Peter Laird博士、Hui Shen博士和Wanding Zhou博士相助开发的内容,Infinium Mouse Methylation BeadChip能够对研究实验室中使用的险些所有鼠种举行表观遗传学剖析,包括野生型、敲除型、转基因和其他类型的工程鼠。通过在单个CpG位点水平上提供定量甲基化丈量,该阵列为明确表观遗传转变提供了强盛的解决计划。

 

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小鼠甲基化芯片

Infinium Mouse Methylation BeadChip

 

产品优势
1.周全的覆盖规模以单核苷酸区分率检测>285K个甲基化位点

 

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Infinium小鼠甲基化芯片提供了癌症中CpG岛、转录起始位点(TSS)、增强子、印迹位点、基因体区域、重复元件区域、层粘连卵白毗连域、CTCF团结位点和超甲基化区域的平衡笼罩,以周全相识小鼠基因组中的甲基化景观。

 

图片Infinium小鼠甲基化芯片笼罩的位点总结

2.高测定重现性:手艺复制的再现性>98%

 

再现性是凭证手艺复制效果的相关性确定的,Infinium甲基化手艺显示出高再现性。

 

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Infinium小鼠甲基化芯片上小鼠肿瘤SMAD3敲除(KO) DNA样本的β值的手艺复制显示出>98%的r2值

 

3.普遍的应用:持表观基因组规模的关联研究,异种移植实验、临床前研究等

 

Infinium小鼠甲基化芯片实现了从基础科学研究光临床前研究的普遍应用。有凌驾200K的改良小鼠菌株,其中许多是为了模拟人类疾病而建设的。Infinium小鼠甲基化珠芯片可用于表观基因组规模的关联研究,由于能够在具有统一遗传配景的受试者中举行情形袒露导致的DNA甲基化转变的测试,因此有助于小鼠举行表观基因组关联研究。

 

项目效劳流程

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样本要求

样品总量:每个样品总量不少于1ug。

样品浓度:最低浓度不低于50ng/ul。

样品纯度:OD 260/280值应在1.82.0 之间。

样品质量:基因组完整、无降解、无RNA污染。

样品运输:DNA低温运输(-20℃);且在运输历程中请用封口膜将样本密封好,以防泛起污染。

 

数据剖析

样实质控统计

数据预处置惩罚和质控

整体甲基化水平

甲基化水平密度漫衍图

甲基化漫衍box图

PCA 聚类图

差别甲基化位点

差别位点表格

差别位点热图

两组样本PCA图

差别在染色体上的漫衍

两组样本间较量火山图

差别甲基化区域

差别甲基化区域表格

功效剖析

GO富集剖析

KEGG富集剖析

 

部分效果展示

 

图片甲基化水平密度漫衍图

图片标准化Beta值的Boxplot图

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PCA 聚类图

 

图片差别甲基化位点的热图

图片差别位点较量火山图

图片差别甲基化基因GO富集柱状图

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差别甲基化基因KEGG富集气泡图

 

应用案例

1. Meyer O S ,  Andersen M M ,  Brsting C , et al. Comparison of global DNA methylation analysis by whole genome bisulfite sequencing and the Infinium Mouse Methylation BeadChip using fresh and fresh-frozen mouse epidermis[J]. Epigenetics. 2022
在这项研究中,作者使用Illumina最近宣布的Infinium小鼠甲基化微珠芯片和全基因组亚硫酸氢盐测序(WGBS)较量了无毛小鼠表皮的整体DNA甲基化水平。两种要领得出的甲基化水平具有高度相关性,证实这两种剖析要领对小鼠表皮DNA甲基化的研究通常同样有用,并且发明新鲜和新鲜冷冻表皮通?梢酝杏玫厥褂。

 

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2. Mani S,Ghosh J,et al. Embryo cryopreservation leads to sex-specific DNA methylation perturbations in both human and mouse placentas. Human Molecular Genetics.2022

体外受精(IVF)与DNA甲基化异常和不良妊娠下场的爆发率较高有关。然而,在众多试管婴儿干预步伐中,哪些袒露导致了这些效果仍然未知。冷冻胚胎移植(ET)越来越多地被用作新鲜胚胎移植的替换品,但报告批注冷冻胚胎移植的先兆子痫和大于胎龄儿的爆发率更高。本项研究使用850K Infinium MethylationEPIC珠芯片阵列检测了人类胎盘中的DNA甲基化,对9名患者在接纳冷冻和新鲜胚胎移植一连有死后提供的胎盘举行配对亚组剖析。同时,使用Infinium Mouse Methylation BeadChip小鼠甲基化微珠芯片剖析来自新鲜和冷冻胚胎移植的八个小鼠胎盘。研究发明与新鲜胎盘相比,冷冻ET后的人和小鼠胎盘显著甲基化,并且这些表观转变具有性别差别性。小鼠和人类的转变之间的相似性强调了小鼠模子在评估体外受精怎样影响表观遗传景观方面的适用性,这关于获得人类组织的有限途径和在小鼠中疏散特定干预步伐的能力是有价值的。

 

 

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3. Perez-Correa J F, Tharmapalan V,et al. Epigenetic Clocks for Mice Based on Age-Associated Regions That are Conserved Between Mouse Strains and Human. Front Cell Dev Biol. 2022

小鼠的朽迈可以通过基因组中特定位点的DNA甲基化转变来追踪。在本项研究中,作者使用最近宣布的Infinium Mouse Methylation BeadChip小鼠甲基化微珠芯片来较量C57BL/6(B6)和DBA/2J(DBA)小鼠中的这种表观遗传修饰。在这些常用的近交系小鼠菌株中视察到了与年岁相关的DNA甲基化的显著差别:在B6小鼠中,年岁相关的低甲基化盛行于CpG岛的集中甲基化,而在DBA小鼠中,CpG岛在朽迈时体现出相当低的甲基化。有趣的是,在B6和DBA小鼠中,年岁相关性最高的CpG仍然重叠,包括基因Hsf4、Prima1、Aspa和Wnt3a。其中Hsf4、Aspa和Wnt3a在人类同源区域的甲基化也与年岁高度显著相关。作者使用四个相关区域的焦磷酸盐测序建设了一个靶向表观遗传时钟,为其他研究职员剖析小鼠朽迈提供了一个通用工具。

 

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